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Ánalise comparativa do uso dos primers oligo (dT) e random na síntese de cDNA a partir de amostras de mRNA

DOI: http://dx.doi.org/10.12702/VIII.SimposFloresta.2014.90-588-1

 

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Viviane F. Anjos1, Ariadne Marques1, Inaê M. A. Silva2, Any C. P. Rodrigues1, Janaína F.Gonçalves1, Marcelo L. de Laia1

 

Resumo: A análise da expressão gênica é de grande importância para os estudos dos processos fisiológicos e metabólicos de indivíduos sob condições de estresse. Nesse processo a obtenção de DNA complementar (cDNA) a molecular de RNA mensageiro (mRNA) mediante a atividade transferase terminal da enzima transcriptase reversa (RT) é uma peça fundamental. No entanto as características do cDNA podem sofrer alterações dependendo da maneira como a reação de transcrição é preparada. Nesse sentido, o presente estudo buscou verificar qual dos dois primers mais utilizados no processo de transcrição, Oligo (dT) ou Random fornecem melhores resultado. Para tanto foram realizados dois processo de transcrição a partir de duas amostras contraste de RNA total, tratadas com a enzima DNase I e purificadas com fenol pH ácido, utilizando cada um dos primers.Análise por eletroforese em gel de agarose para as duas amostras após a síntese do cDNA possibilitaram a visualização de rastros e bandas indicando o sucesso do processo. Os resultados demostraram que ambos os primers, dentro de suas especificidades, foram eficientes no processo de síntese do cDNA fita dupla.Permitindo inferir que a escolha do primer dependerá das especificidades do processo no qual o cDNA obtido será subsequentemente utilizado.

Palavras-chave: biotecnologia; expressão gênica; estresse; transcriptase reversa

 

1 Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (vivis.anjus@gmail.com; ariadne.marqs@hotmail.com; anycarol_rd@hotmail.com; gonferja@yahoo.com.br; marcelolaia@gmail.com)
2 Universidade de Brasília (inaemarie@hotmail.com)

 

Literatura Citada

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